
文章標題:LC-MS/MS法測定人血清中的可替寧和3-羥基可替寧含量及其應(yīng)用
客戶單位:北京醫(yī)院檢驗科/國家老年醫(yī)學(xué)中心
匯智泰康提供服務(wù):建立和驗證可替寧和3-羥基可替寧的含量檢測的LC-MS/MS方法,完成上千例人血漿中可替寧和3-羥基可替寧的含量檢測
文章概要:
【研究背景】
煙草流行是世界上面臨的最大公共衛(wèi)生威脅之一,每年造成700多萬人死亡。這些死亡人數(shù)超過600萬是直接吸煙的結(jié)果,而大約89萬人是非吸煙者接觸二手煙的結(jié)果。因此準確可靠的評價環(huán)境煙草煙霧的暴露水平刻不容緩??商鎸幨菬煵葜心峁哦≡谌梭w內(nèi)的主要代謝物,是目前評價吸煙暴露水平的最佳生物指標之一。
目前國內(nèi)外對生物樣本中可替寧和3-羥基可替寧的測定方法有氣相色譜,高效液相色譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)等,但這些方法都存在一定的局限性,如樣本處理過程復(fù)雜 ,血清用量較大,檢測時間較長,靈敏度低等。本實驗擬建立高效、靈敏、準確、專屬性強的LC-MS/MS方法,以測定人血清中可替寧和3-羥基可替寧的含量水平。同時兩個代謝物成分的比值,對于吸煙者成癮性分析等方面都有很好的參考意義。
【研究方法】
人血清樣本以乙腈沉淀蛋白后,選用ZORBAX SB-Phenyl色譜柱,以甲醇(含0.3%甲酸)-水(含0.15%甲酸)為流動相進行分離;選用API5500型三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀的多重反應(yīng)監(jiān)測(MRM)掃描方式進行監(jiān)測。
【研究結(jié)果】
可替寧,3-羥基可替寧和可替寧-d3同位素內(nèi)標的保留時間分別為2.56 min,1.58min和2.56 min;血清中可替寧和3-羥基可替寧線性范圍為0.05~500 ng·mL-1,0.50~1250 ng·mL-1??商鎸幎肯孪逓?/font>0.05 ng·mL-1,3-羥基可替寧為0.5 ng·mL-1。日內(nèi)、日間相對標準差(RSD)均小于11%;相對偏差(RE)均在±7%的范圍以內(nèi);平均提取回收率可替寧為98.54%,3-羥基可替寧為100.24%。



【研究結(jié)論】
結(jié)果表明,該方法快速、靈敏高、專屬性強、重現(xiàn)性好,適用于臨床人血清中可替寧和3-羥基可替寧的快速檢測。通過測定人血清中可替寧的含量可以確定最佳臨界值,為區(qū)分吸煙與非吸煙人群提供依據(jù)。
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匯智泰康的分析測試實驗室是以質(zhì)譜分析為核心能力的分析檢測平臺,可對內(nèi)源及外源化合物進行精準定量、定性分析。實驗室配備了多套質(zhì)譜AB SCIEX 質(zhì)譜分析儀(LC-MS/MS),其中包括TRIPLE QUAD 5500、API 5000、API 4000 QTRAP以及QTOF 5600+,還配有多臺氣質(zhì)和氣質(zhì)質(zhì)聯(lián)用儀 (GC-MS&GC-MS/MS)、高效液相色譜、元素分析儀(Thermo ICP-MS)、原子吸收(AAS)、原子熒光(AFS)等檢測儀器。此外還配備有大量的分析相關(guān)的儀器及輔助設(shè)備。