文章標(biāo)題：LC-MS/MS法測(cè)定人血清中的可替寧和3-羥基可替寧含量及其應(yīng)用
客戶單位：北京醫(yī)院檢驗(yàn)科/國(guó)家老年醫(yī)學(xué)中心
匯智泰康提供服務(wù)：建立和驗(yàn)證可替寧和3-羥基可替寧的含量檢測(cè)的LC-MS/MS方法，完成上千例人血漿中可替寧和3-羥基可替寧的含量檢測(cè)
文章概要：
【研究背景】
煙草流行是世界上面臨的最大公共衛(wèi)生威脅之一，每年造成700多萬(wàn)人死亡。這些死亡人數(shù)超過(guò)600萬(wàn)是直接吸煙的結(jié)果，而大約89萬(wàn)人是非吸煙者接觸二手煙的結(jié)果。因此準(zhǔn)確可靠的評(píng)價(jià)環(huán)境煙草煙霧的暴露水平刻不容緩。可替寧是煙草中尼古丁在人體內(nèi)的主要代謝物，是目前評(píng)價(jià)吸煙暴露水平的最佳生物指標(biāo)之一。
目前國(guó)內(nèi)外對(duì)生物樣本中可替寧和3-羥基可替寧的測(cè)定方法有氣相色譜，高效液相色譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS/MS）等，但這些方法都存在一定的局限性，如樣本處理過(guò)程復(fù)雜 ，血清用量較大，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，靈敏度低等。本實(shí)驗(yàn)擬建立高效、靈敏、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)的LC-MS/MS方法，以測(cè)定人血清中可替寧和3-羥基可替寧的含量水平。同時(shí)兩個(gè)代謝物成分的比值，對(duì)于吸煙者成癮性分析等方面都有很好的參考意義。
【研究方法】
人血清樣本以乙腈沉淀蛋白后，選用ZORBAX SB-Phenyl色譜柱，以甲醇（含0.3%甲酸）-水（含0.15%甲酸）為流動(dòng)相進(jìn)行分離；選用API5500型三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀的多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）掃描方式進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
【研究結(jié)果】
可替寧，3-羥基可替寧和可替寧-d3同位素內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間分別為2.56 min，1.58min和2.56 min；血清中可替寧和3-羥基可替寧線性范圍為0.05~500 ng·mL-1，0.50~1250 ng·mL-1。可替寧定量下限為0.05 ng·mL-1，3-羥基可替寧為0.5 ng·mL-1。日內(nèi)、日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）均小于11%；相對(duì)偏差（RE）均在±7%的范圍以內(nèi)；平均提取回收率可替寧為98.54%，3-羥基可替寧為100.24%。
【研究結(jié)論】
結(jié)果表明，該方法快速、靈敏高、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，適用于臨床人血清中可替寧和3-羥基可替寧的快速檢測(cè)。通過(guò)測(cè)定人血清中可替寧的含量可以確定最佳臨界值，為區(qū)分吸煙與非吸煙人群提供依據(jù)。
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匯智泰康的分析測(cè)試實(shí)驗(yàn)室是以質(zhì)譜分析為核心能力的分析檢測(cè)平臺(tái)，可對(duì)內(nèi)源及外源化合物進(jìn)行精準(zhǔn)定量、定性分析。實(shí)驗(yàn)室配備了多套質(zhì)譜AB SCIEX 質(zhì)譜分析儀（LC-MS/MS），其中包括TRIPLE QUAD 5500、API 5000、API 4000 QTRAP以及QTOF 5600+，還配有多臺(tái)氣質(zhì)和氣質(zhì)質(zhì)聯(lián)用儀 （GC-MS&GC-MS/MS）、高效液相色譜、元素分析儀（Thermo ICP-MS）、原子吸收（AAS）、原子熒光（AFS）等檢測(cè)儀器。此外還配備有大量的分析相關(guān)的儀器及輔助設(shè)備。
